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本生教您如何選擇PCR實(shí)驗(yàn)耗材?
關(guān)于PCR實(shí)驗(yàn)有哪些影響因素呢?我們一般想到的可能是獲取的DNA/RNA質(zhì)量、反轉(zhuǎn)錄的效率、引物的特異性乃至DNA聚合酶的保真度、擴(kuò)增長(zhǎng)度等問題,但很少有人會(huì)想到耗材的選擇,可能也會(huì)影響您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
首先需要明確的是我們做的是哪種PCR實(shí)驗(yàn)。根據(jù)檢測(cè)方法的不同,PCR實(shí)驗(yàn)分為普通PCR法和熒光定量PCR法,前者一般是終點(diǎn)PCR跑膠法測(cè)定,所以在選擇耗材時(shí)需要關(guān)注的主要是耗材本身的導(dǎo)熱性和密封性;而后者是實(shí)時(shí)檢測(cè)熒光信號(hào),除了導(dǎo)熱性和密封性外,對(duì)透光性和避光性也有所要求。換句話而言,可以做熒光定量PCR的耗材一定可以來做普通PCR,反之,效果卻會(huì)差很多!具體本生小編總結(jié)如下:
確定好了實(shí)驗(yàn)類型,我們就可以選擇耗材了,如前面所述,我們知道了密封性、導(dǎo)熱性、透光性、避光性等因素是我們需要關(guān)注的,那為什么要關(guān)注這些呢?
一、密封性
密封性越好,產(chǎn)物的揮發(fā)越少,得到的產(chǎn)物就越多同時(shí)氣溶膠的產(chǎn)生也越少,對(duì)于下一輪實(shí)驗(yàn)的污染也就越少,也就意味著假陽性的產(chǎn)生率越低。
二、導(dǎo)熱性
導(dǎo)熱性越好越均一,PCR的速度就越快,準(zhǔn)確度也越高。
三、透光性
這主要是對(duì)于熒光定量而言,我們知道它是一種實(shí)時(shí)定量的方式,那么耗材本身的透光性就直接關(guān)系到我們檢測(cè)到的熒光信號(hào)多少,如果選擇耗材透光性不足,本該檢測(cè)到的信號(hào)檢測(cè)不到,那就會(huì)造成我們對(duì)結(jié)果的誤判。
四、避光性
這也是針對(duì)熒光定量而言的,同上面的因素,如果我們?cè)谡麄€(gè)實(shí)驗(yàn)過程中沒注意避光,帶有熒光的試劑過度被消耗,那*直接就會(huì)影響我們實(shí)驗(yàn)的擴(kuò)增效率,導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果產(chǎn)生。 實(shí)
PCR單管
采用*的一次注塑成型技術(shù),超薄設(shè)計(jì),熱傳導(dǎo)快,視窗比平面低,不易被劃擦,管子密封性更好,近乎零蒸發(fā),減少了氣溶膠的污染,程度避免了假陽性的產(chǎn)生。熒光系列,蓋子高度透光,可適用于頂讀與低讀。
八聯(lián)管(適用普通PCR)
低于平面的高透視窗設(shè)計(jì),可以*大程度避免被劃擦。進(jìn)口的原材料的使用使得管壁具有均一的平整和穩(wěn)定的不黏壁性,確保了樣品處理和吸取時(shí)的準(zhǔn)度。
PCR板
不同于市面上其他廠家底部注塑的方式,注塑點(diǎn)是在板面上的孔與孔的交叉處,這樣使得PCR板的管底與PCR儀的接觸更好,同時(shí)采用純度高的聚丙烯,超薄設(shè)計(jì)、壁厚一致均勻的工藝使得熱傳導(dǎo)確、控溫準(zhǔn)確、有效減少了實(shí)驗(yàn)循環(huán)時(shí)間。
PCR產(chǎn)品介紹
一次性PCR管采用聚丙烯(PP)材料制成,一體化設(shè)計(jì),整套產(chǎn)品配合平穩(wěn),透明性強(qiáng),柔軟性能好,耐腐蝕性強(qiáng),產(chǎn)品防靜電,氣密性良好.
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