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　　ELISA實驗操作要點

　　每個實驗都有自己的規(guī)則以及注意點，elisa實驗也不例外，對于elisa實驗如此條件嚴(yán)格的，那么如何才能保障elisa實驗的正常進行呢，下面本生生物操作人員的技術(shù)要求，的確是如此，下面就是elisa實驗時索要注意的問題。

　　ELISA實驗操作18條要點：

　　1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過2%?？捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但hao有專業(yè)人員進行矯正。

　　2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。

　　3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。

　　4、實驗時，要使底物避光保存。

　　5、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

　　6、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

　　7、將液體加到酶標(biāo)孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

　　8、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。

　　9、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。

　　10、洗板時，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。

　　11、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

　　12、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。

　　13、檢測前，要打開酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。

　　14、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。

　　15、待檢樣品要澄清，否則會影響結(jié)果。

　　16、溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。

　　17、應(yīng)盡量做雙孔實驗，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

　　18、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。

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