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蛋白檢測-雙縮脲蛋白定量試劑盒產(chǎn)品資料
規(guī)格:500T 1000T
保存條件:RT
保質(zhì)期:1年
產(chǎn)品名稱:雙縮脲蛋白定量試劑盒
雙縮脲蛋白定量試劑盒
簡介:
雙縮尿是一種用于分析蛋白的方法,雙縮尿反應(yīng)的愿意實在呈藍(lán)色的堿性硫酸銅溶液存在的情況下,銅離子與肽鍵形成有色螯合的銅復(fù)合物,呈紫色。所潺潺的顏色密度與參與反應(yīng)肽鍵數(shù)成正比。但易受銅離子螯合劑影響,例外,對于血清總蛋白的雙縮尿分析,膽紅素、脂類、血紅蛋白、葡聚糖具有一定干擾作用。雙縮尿法在 10~ 160mg/ml 濃度范內(nèi)有較好的現(xiàn)性關(guān)系。
組成:
儲存條件:
RT,12個月有效。
操作步驟(僅供參考):
1ml 蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液或稀釋液加入到蛋白標(biāo)準(zhǔn)(BSA)中,充分溶解后配制成 160mg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液,配置后立即使用,溶解后的蛋白溶液應(yīng)于-20℃保存。
1、將標(biāo)準(zhǔn)品按 0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl 加到 96 孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔,加稀釋液補(bǔ)足至20μl。
2、加適當(dāng)體積待測蛋白樣本到 96 孔板的樣品孔中。如果標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液與溶解待測蛋白樣本的溶液不同,應(yīng)在待測的蛋白樣本孔中加入 20μl 稀釋液。
3、各孔加入 200μl 雙縮脲試劑, 室溫放置。
4、測定 540nm 波長處的吸光值,如無 540nm,520~562nm 之間的波長也可。
5、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品的蛋白濃度。
蛋白檢測-雙縮脲蛋白定量試劑盒注意事項:
1. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)(BSA)粉末溶解于蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液后,即獲得蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液,該原液中含有防腐劑,不妨礙后期檢測,該蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液應(yīng)在-20℃長期保存。
2. 待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中,否者待測蛋白與蛋白標(biāo)準(zhǔn)中所含非蛋白成分不一致,有可能導(dǎo)致測定不準(zhǔn)確。
3. 待測蛋白和蛋白標(biāo)準(zhǔn)加入雙縮脲試劑后,如果發(fā)現(xiàn)檢測效果不佳。
4. 測定標(biāo)準(zhǔn)曲線時發(fā)現(xiàn)隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加吸光度或顏色沒有明顯變化,可能的原因是樣品中含有銅離子螯合劑。
5. 建議每次測定時都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。因為顏色會隨著時間的延長不斷加深,并且顯色反應(yīng)的速度和溫度有關(guān),所以除非精確控制顯色反應(yīng)的時間和溫度,否則如需精確測定宜每次做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
6. 如果沒有酶標(biāo)儀,也可以使用普通的分光光度計測定,但應(yīng)考慮根據(jù)比色皿的最小檢測體積。
7. 檢測中發(fā)現(xiàn)所有孔都呈暗紫色,可能原因是樣品含有還原劑,應(yīng)適當(dāng)透析或稀釋樣品。
8. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
9. 本產(chǎn)品僅供科研使用,嚴(yán)禁它用。
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