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BUNSEN本生:PCR板封膜正確的貼膜方法
如何給96孔PCR板封膜,確保封板膜與96孔板親密貼合,防止液體蒸發(fā),才能保障實(shí)驗順利。BUNSEN本生小編分享如何正確地封膜?
第1步 將封板膜貼在板子上從自封袋中取出單張封板膜,然后重新封好自封袋,以保持其中的無酶環(huán)境。如下圖所示,保持底襯面朝上,握住封板膜,沿著切線處慢慢撕下底襯。
隨后,將封板膜粘性面的一端貼在板子上,掌握好距離和角度,避免后續(xù)貼歪。貼的過程中一端貼,另一端拉住。
注:一定要戴手套
如果使用單端標(biāo)簽的封板膜,則將襯紙部分除去,然后將封板膜錨固到板上,使其密封在整個板上,然后繼續(xù)除去襯紙。這種方法可以消除封板膜產(chǎn)生的卷曲和回滾。
如果使用兩個末端標(biāo)簽的產(chǎn)品,請以連續(xù)平滑的方式剝離中心襯紙。緩慢剝離內(nèi)襯可以程度地減少卷曲。注意不要接觸薄膜的粘合表面。
第2步 壓膜
使用壓膜板緩慢刮壓封板膜,使其全部密封到板上。假如沒有專用的壓膜板,可以找一個邊緣光滑的卡,比如沒有錢的銀行卡或公交卡等。壓膜步驟應(yīng)至少水平和垂直執(zhí)行兩次。施加足夠的力(也別太大力)對于獲得良好的密封性至關(guān)重要。如下圖A和B所示,水平兩次,垂直兩次。
將壓膜板沿著孔板的所有外邊緣刮壓至少兩次,確保施加堅定而持續(xù)的壓力。如上圖C和D所示,孔間和邊緣要都要壓一遍。為了好結(jié)果,要耐心。將封板膜正確密封到板上之后,沿切線撕下接頭部分。
注:
壓膜的時候,另一只手要穩(wěn)住板子,避免板子劇烈晃動
第3步 檢查
密封后仔細(xì)檢查平板,確認(rèn)薄膜與板之間是否緊密貼牢。確認(rèn)每個孔周圍的粘貼痕跡,平板的整個表面(包括周邊)都被密封,以及膜上是否有液體。封板膜不應(yīng)出現(xiàn)褶皺,如果觀察到皺紋,則說明板未正確密封。
注:
注意對于邊緣凸起的平板,封板膜在板上定位可能不正確,要避免膜向上延伸到板的側(cè)壁上在開始PCR實(shí)驗前之前將密封的平板放置至少10分鐘,封板膜的粘合力將隨著時間增加有條件話,使用孔板專用離心機(jī)離心。
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